BioP/工艺方法类验证/清洁工艺验证（CV）.md

清洁验证的历史

清洁验证典型案例

消胆胺树脂召回事件

1988年美国某药企生产的消胆胺树脂在抽检过程中发现杀虫剂成分，选择召回所有产品

原料厂杀虫剂产品→溶剂桶存在交叉混用→回收溶剂被杀虫剂污染→中间体中检出杀虫剂→消胆胺API中发现杀虫剂→流化床捕集袋发现杀虫剂残留

FDA警告信

2017.01.18 FDA检查官现场发现明显设备生锈、车间内有昆虫、设备内部破损，并且在标识干净的设备上发现有明显的药粉残留

2018.04.16 某药企药品与杀虫剂共线生产，并且清洁方法未进行充分验证，存在极大风险，30年前的缺陷再次发生

2018.05.09 清洁验证报告没有完成，产品已经放行销售，清洁验证报告在产品销售后才批准

发展历史

20世纪80年代

行业重点关注工艺验证，一些公司也开始对清洗程序进行验证

1984年

撒母耳.哈德（Samuel Harder）出版了“The Validation of Cleaning Procedures”，清洗程序建立的限度必须是：

• 可实践的和可完成的
• 必须被公司的分析方法确认
• 安全的可接受的
• 成线性

1989年

道格.门登霍尔在“药品研发和工业药剂学”中出版一个章节“清洁验证”，他进一步对哈德的想法提出建议：

• 使用矩阵法
• 测试清洗剂残留
• 空白批次
• 目视检查法（错误的结论：目视检查结果是最严格的）
• 限度的建立应该根据毒性和治疗剂量，或者二者选一
• 增加安全因子，并提出限度的建立应该根据最小批量和最大治疗剂量的组合

美国礼来公司的复尔曼和马琳出版文章

• 最低日治疗剂量限度1/1000

  • 解释了1/1000由3个1/10组合
  • 药品正常剂量的1/10是非活性的
  • 安全因子
  • 清洁验证的执行是粗放的

• 10ppm限度

  • 10ppm没有明确的解释，只是引用了哈德的想法
  • 增加目视检查标准

• 二者结合

• 这篇文章是清洁验证的里程碑

法规和指南

国内

NMPA

2010版GMP

第四十六条：为降低污染和交叉污染的风险，厂房、生产设施和设备应当根据生产药品的特性、工艺流程及相应洁净级别要求合理设计、布局和使用，并符合下列要求：

• • 应当综合考虑药品的特性、工艺和预定用途等因素，确定厂房、生产设施和设备多产品共用的可行性，并有相应评估报告
  • 生产特殊性质的药品，如高致敏性药品（青霉素类）或生物制品（如卡介苗或其他用活性微生物制备而成的药品），必须采用专用和独立的厂房、生产设施和设备。青霉素类药品产尘量大的操作区域应当保持相对负压，排至室外的废弃应当经过精华处理并符合要求，排风口应当远离其他空气净化系统的进风口
• 第七十一条：设备的设计、选型、安装、改造和维护必须符合预定用途，应当尽可能降低产生污染、交叉污染、混淆和差错的风险，便于操作、清洁、维护，以及必要时进行的消毒或灭菌
• 第七十四条：生产设备不得对药品质量产生任何不利影响。与药品直接接触的生产设备表面应当凭证、光洁、易清洗或消毒、耐腐蚀，不得与药品发生化学反应、吸附药品或向药品中释放物质
• 第七十六条：应当选择适当的清洗、清洁设备，并防止这类设备成为污染源
• 第一百四十三条：清洁方法应当经过验证，证实其清洁的效果，以有效防止污染和交叉污染。清洁验证应当综合考虑设备使用情况、所使用的清洁剂和消毒剂、取样方法和位置以及相应的钱一样回收率、残留物的性质和限度、残留物检验方法的灵敏度等因素

2010版GMP附录确认与验证

• 第三十八条：为确认与产品直接接触设备的清洁操作规程的有效性，应当进行清洁验证。应当根据所涉及的物料，合理地确定活性物质残留、清洁剂和微生物污染地限度

• 第三十九条：在清洁验证中，不能采用反复清洗至清洁的方法。目视检查是一个很重要的标准，但通常不能作为单一可接受标准使用

• 第四十条：清洁验证的次数应当根据风险评估确定，通常应当至少进行连续三次。清洁验证计划完成需要一定的时间，验证过程中每个批次后的清洁效果需及时进行确认。必要时企业在清洁验证后应当对设备的清洁i效果进行持续确认。

• 第四十一条：验证应当考虑清洁方法的自动化程度。当采用自动化清洁方法时，应当对所用清洁涉笔设定的正常操作范围进行验证；当使用人工清洁程序时，应当评估影响清洁效果的各种因素，如操作人员、清洁规程详细程度（如淋洗时间等），对于人工操作而言，如果明确了可变因素，在清洁验证过程中应当考虑相应的最差条件

• 第四十二条：活性物质残留限度标准应当基于毒理试验数据或毒理学文献资料的评估建立

  • 如使用清洁剂，其除去方法及残留量应当进行确认
  • 可接受标准应当考虑工艺设备链中多个设备潜在的累积效应

• 第四十三条：应当在清洁验证过程中对潜在的微生物污染进行评价，如需要，还应当评价细菌内毒素污染。应当考虑设备使用后至清洁前的间隔时间以及设备清洁后的保存实现对清洁验证的影响

• 第四十四条：采用阶段性生产组织方式时，应当综合考虑阶段性生产的最长时间和最大批次数量，以作为清洁验证的评价依据

• 第四十五条：当采用最差条件产品的方法进行清洁验证模式时，应当对最差条件产品的选择依据进行评价，当生产线引入新产品时，需再次进行评价。如多用途设备没有单一的最差条件产品时，最差条件的确定应当考虑产品毒性、允许日接触剂量和溶解度等。每个使用的清洁方法都应当进行最差条件验证

• 在同一工艺步骤中，使用多台同设备生产，企业可在评估后选择由代表性的设备进行清洁验证

• 第四十六条：清洁验证方案应当详细描述取样的位置、所选取的取样位置的理由以及可接受标准

• 第四十七条：应当采用擦拭取样和（或）对清洁最后阶段的淋洗液取样，或根据取样位置确定的其他取样方式取样

• 擦拭用的材料不应当对结果有影响。如果采用淋洗的方法，应当在清洁程序的最后淋洗时进行取样。企业应当评估取样的方法的有效性

• 第四十八条：对于处于研发阶段的药物或不经常生产的产品，可采用每批生产后确认清洁效果的方式替代清洁验证。每批生产后的清洁确认应当根据本附录的相关要求进行。

• 第四十九条：如无法采用清洁验证的方式来评价设备清洁效果，则产品应当采用专用设备生产

2010版GMP指南 2003

• 《药品GMP指南》中，原料药、口服固体制剂、无菌药品均对清洁验证实施进行了指导
• 《质量管理体系》P109

国标

GBZ230-2010：职业性接触毒物危害程度分级（LD50）

国外

ICH

ICH Q3C杂质：残留溶剂指南

• 药品生产和清洁中可能用到除水外的有机溶剂
• 将溶剂分为3个级别
  • 一类：仅在不可替代的情况下用于药品生产，但不能用作清洁剂
  • 二类：仅在不可替代的情况下用于药品生产，但不能用作清洁剂
  • 三类：在无法避免时，可作为清洁剂，其在下批生产中允许的残留浓度不应超过初始溶剂浓度的0.5%
• ADE/PDE计算时的系数F1~F5的确认方法

ICH Q7 原料药GMP指南

• 对象是原料药，清洁验证章节在12.7中，描述了原料药生产过程中清洁验证的特征
  • 仅需要对风险最大的步骤进行验证
  • 多个步骤在同一设备内生产时，需要对产品进行分组选取“Worst case”对其进行验证
  • WIP与淋洗取样在API生产过程中的普遍性

EMA

EudraLex-第四卷 GMP

• 336
  • 生产设备的涉及必须容易进行彻底清洁，必须按照详细的书面操作规程进行清洁并储存在清洁干燥的条件下
• 337
• 洗涤和清洁设备必须正确选择，保证在使用时不会带来污染

附录15 确认与验证

10.1~10.15 清洁验证

10.1 为了确认产品接触的所有设备的清洁程序的有效性，应该进行清洁验证。模拟剂可以配合合适的科学论证使用。对于类似的设备可分组进行，选择特定设备进行清洁验证，最好有合适的论证

10.6.2 当无法测试某些特殊产品残留时，可以选择其他具有代表性的参数进行测试，如：TOC、电导率

10.10 当采用最差条件产品方法作为清洁验证的模式时，要对选择最差条件的依据进行说明，新产品对生产地的影响也要评估。最差条件的选择标准应该考虑产品的溶解性、清洁性、毒性和效力

10.11 清洁验证方案应该指定取样位置，选择这些位置的理由，并规定可接受标准

10.14 如果某些设备没有有效的或者合适的清洁工艺，应该参照欧盟药品法规为每个产品选择专用设备或者其他适当的措施

10.15 采用人工清晰设备时，特别重要的是应该确认在一个经过论证的频次下人工清洗效果

EMA相关指南

EMA/CHMP/CVMP/SWP/246844（2018.04.19发布）

基于风险防止药品药品生产中交叉污染以及“在公用设施中生产不同药品使用风险辨识建立角亢暴露限度指南”实施回答

所有药品都需要建立HBEL（基于健康的暴露限度），用于计算HBEL的毒理或药理数据，需要在药品生命周期中定期评估

采用健康基础数据的可接受标准

ADE/PDE=NOAEL✖BW/（F1✖F2✖F3✖F4✖F5）

ADE：可接受日暴露水平

NOAEL：无可见副作用水平

BW：平均成人体重

F1~F5：修正系数，参考ICH Q3C对其进行确定

APIC 201405 原料药厂清洁验证指南

APIC指南最新版为2016.09

APIC指南侧重于API剂型

与EMA使用基于健康数据设定清洁可接受标准的指南保持一致

本指南与“ISPE基于风险的药品生产指南”保持一致，遵守ICH Q9的”质量风险管理流程“

OEL数据也可以用于计算设备清洁接受标准的ADE/PDE值

The OEL data can also be used to calulate the ADE/PDE for setting the acceptance criteria for cleaning of equipmentFDA

EP 9.6 欧洲药典

FDA

21CFR 210&211

• 第1条：建立书面标准操作规程（SOP），其中必须详细规定设备各种部件的清洗过程
• 第2条：必须建立书面的清洗方案验证通则
• 第3条：清洗方法验证通则应规定执行验证的负责人、批准验证工作的负责人，验证标准（合格标准）、再验证的时间
• 第4条：对各生产系统或各设备部件进行清洗验证之前，应制定专一特定的书面验证计划，其中应规定取样规程，分析方法
• 第5条：按上述验证计划进行验证工作，记录验证结果
• 第6条：做出最终的验证报嘎，报告应由相关管理人员批准，并说明该清洗方法是否有效
• 211.67设备清洁与维护
  • 间隔一定时间应该对设备和用具进行清洗、维护和消毒，防止可能的故障和污染及改变药品安全性、均一性、效价、质量和纯度

FDA清洁验证指南

• 是FDA检查官和其他工作人员的参考资料
• 为了建立检查的连贯一致性
• 适用于设备的化学残留物的清洁验证

PDA TR 29 清洁验证 2012

PDA TR 49 生物计数清洁验证考虑要点

• 关注了生物技术生产，包括细菌和细胞培养发酵，血浆和鸡蛋生产的疫苗
• 对象主要是生物制剂，指南里面的原则也能用于其他剂型

USP 42 NF37

PDA

PDA TR 29 清洁验证考虑要点 2012

PDA TR 49 生物技术清洁验证考虑要点 2010

• 本报告关注了生物技术生产，包括细菌和细胞培养发酵、血浆和鸡蛋生产的疫苗
• 该指南的对象主要是生物制剂，指南里面的原则也能用于其他剂型

PIC/S 清洁验证指南

• PI 006 验证总计划、安装和操作确认、非无菌工艺验证，清洁验证
• “如果产品和工艺非常类似，清洁程序美哟必要分别进行验证。对相似产品和工艺选择一个有代表性的范围，并对所选定的产品和工艺的关键项目进行验证是可以接受的。可以在最差条件下进行单独的验证考察，需考虑相关的接受标准，这种方式叫做”分组“
• PIC/S不接受10PPM的计算方式

ISPE

Volume 7 MAPP Second Edition《基于风险的药品生产》第二版更新内容

• 运用质量风险管理的方法确定产品是否能共线生产
• 将质量风险管理的方法与EMA指南中需要毒理学评估合并，控制的基础是是否质量风险管理流程的结果导致的技术和组织
• EMA指南发布“共用设施中不同药品生产风险识别所用基于健康的暴露限度设定指南”用来提供指导如何设定基于健康的限度，本指南也强调“ADE与PDE本质上意义相同”
• 与美国和欧盟法规中的“全生命周期”的方法一致，将工艺涉及、工艺确认、持续工艺确认合并。工艺验证全生命周期表明验证不是一次性或一过性的，而是一个持续控制策略来管理风险并维持工艺控制

ISPE指南：清洁验证生命周期-2020

ASTM E3106-18 基于科学和风险的清洁工艺开发和验证

• 2018年发布
• 采用生命周期方法实施清洁验证
• 建议使用基于科学、风险和统计学的清洁开发过程和验证
• 使用实验涉及优化清洁过程
• 产品和设备的分组也应该基于风险分析

日常类比例子-饭后洗碗

清洁验证的定义

有文件和记录证明所批准的清洁规程能有效地清洁设备，使之符合药品生产要求

清洁验证的范围

• 通过合理的风险评估确定出的直接接触产品的设备与部件
• 清洁的范围包括清洁验证的范围，比清洁验证范围广 不是墙面、不是地面
• 分类

毒理数据查询的网站

• http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov
• http://www.chemspider.com/
• http://toxnet.nlm.nih.gov/
• http://www.chemicalbook.com/
• http://www.drugfuture.xom/toxic/

流程

• 清洁方法和清洁分析方法开发→清洁验证风险评估（多产品共线风险评估）→清洁验证执行
• 类似生产工艺验证？

如何验证清洁程序

• 影响的因素

  • 物料分解对于产品的污染
  • 物料累积对于清洁效果的影响

• 连续生产长度

• 当次啊用阶段性生产组织方式时，应当综合考虑阶段性生产的最长时间和最大批次数量，以作为清洁验证的评价依据

• 设备使用后至清洁前的间隔时间

• 适用于生产后不及时清洁的设备

• 为验证待清洁设备放置时间，对相似产品，工艺和清洁程序可采用设备和产品分组来选择最差条件进行待清洁（设备）放置时间的验证

• 设备清洁后的保存时限

• 情节i设备存放时间的研究验证了设备在规定的储存条件下放置一段时间，其能保持微生物限度

• 清洁存放时间研究适用于清洁后不立即使用或使用前不清洁的设备

• 设备的清洁程序必须说明设备（包括部件）作为清洁设备的日常存储条件

清洁验证的前提条件

• 健康&安全

  • 对于所有的产品及清洗剂是否具有相应的健康与安全数据？
  • 是否对清洁操作进行了评估

• 设备&设施的设计

  • 设计是否易于清洁与检查
  • 是否对自动系统进行了确认（如在线清洗系统）

• 清洁规程的开发

  • 清洁规程是否全面、一致、详尽，准确并且经过批准
  • 是否定期对清洁规程进行回顾
  • 设备清洁记录
    • 有唯一编号，需包含
      • 已清洁的设备（包括唯一的编号）
      • 执行清洁操作的人员，如适用
      • 执行清洁操作的时间
      • 执行清洁流程所用的SOP
      • 实际执行清洁操作的参数（如时间、警报状态、结果）
      • 描述设备执行清洁之前所生产的产品（如适用）

清洁方法和清洁分析方法开发

清洗的原理与分类

清洗过程原理

• 物理方法

  • 机械式冲淋、擦洗、真空除尘、溶解等

• 化学方法

  • 乳化、螯合、分散、水解、氧化还原作用等

清洗方法分类

• 自动清洁方法、半自动清洁方法、手动清洁方法
• 在线清洁方法和离线清洁方法
• 溶剂回流清洁法
• 安慰剂清洁法

清洗的重要参数（TACT）

• Time 时间

  • 直接的：采用计时器
  • 间接的：体积和流量

• Action作用

  • 清洁剂的机制：浸泡、洗涤冲击或湍流

• Concentration浓度

  • 直接影响清洗工艺性能

• Temperature温度

  • 适宜的温度范围

清洗的基本规律

• 碱能去除有机污垢（脂肪、蛋白质和碳水化合物）
• 氧化剂加入碱中对有机污垢的清洁效果比单纯碱的效果好
• 强碱去除变性的和聚合的有机污垢效果好
• 酸去除无机污垢效果好

清洗工艺步骤

常规步骤：清洁→消毒

清洗方法开发及清洁SOP制定

清洁方法的开发

按清洁方法的分类，可以按各类清洁方式的特点，选择相应的清洁方法，再进行清洁方法的开发，开发清洁方法时需要考虑如下因素：

• 正确的清洁剂

  • 清洁剂应分局科学原理来选择，选择时应考虑
    • 高效清洗，具有广谱性
    • 所含成分已知
    • 一致性，每批可追溯性
    • 稳定性好
    • 毒性低，使用安全
    • 完全可以清洗

• 清洗参数

  • 人工清洗与在位清洗（CIP）比较
    • 图片

• 人工清洗在清洗作用上好于CIP，但是在时间、浓度、温度方面表现不如CIP，另外CIP的重现性要明显优于人工清洗
• 设备表面的几何结构
• 残留物的类型
• 残留物的污染程度
• 残留物的附着时间：新鲜的残留物比干了的更容易清洁

实验室清洗评估

• 将污垢物涂在几个取样板上
• 将涂有污垢物的取样板进行干燥或烘干，以模拟最差条件
• 使用选择的清洗工艺进行清洗工艺进行清洗
• 筛选合适的清洗剂
• 确定适于最差条件的清洁参数：浓度、温度和时间
• 使用合适的方法测定清洁效果
• 研究杂质的悬浮性、发泡性和饱和性

清洁SOP的制定

人工清洁和CIP结果的比较

• 已验证的人工清洗操作工艺

  • 覆盖性及接触性
  • 清洗技术
  • 详细的步骤
  • 分解的范围
  • 储存及重组的方法
  • 用于清洗的工具
  • 测量的标准
  • 指派经过专业培训的操作人员

• 详细的SOP

  • 由组件编号和描述的材料清单

    • 责任清单：准备、清洁、检查

• 程序

  • 具体的设备类别
  • 步骤和顺序
  • 简洁、清晰的描述，但要具体
  • 包括时间、措施活动、浓度和温度（TACT)
  • 参考不同的测量或标准来确定达到TACT参数
  • 包括文件的要求
  • 包括用图表解释清楚

• SOP的内容

  • 准备程序：准备的地点、工具和清洁剂
  • 文件的要求：状态标识，检查清单、清洁和使用日志
  • 拆卸的要求：拆卸的图表和数码照片
  • 清洁程序：流程、工具、TACT、测量
  • 结束程序：工具、容器、运输工具的清洁
  • 检查程序：检查的方法、工具、位置
  • 干燥程序：环境/控制
  • 包装/附盖/储存的要求：材料、处理方法、位置
  • 清洁后的文件要求：再标识、清洁和使用日志
  • 清洁有效期的要求：日期的要求，再清洁的要求
  • 使用前检查的要求：有效期的确认，包装完整性的确认

• 清洗SOP特有的内容

  • 设备使用后到清洁前的间隔时间
  • 清洁后使用前的间隔时间
  • 清洁频率（是否和清洁水平有关，比如全面清洁和简单清洁）
  • 影响清洁的要素应该包括再批记录中或清洁规定中

分析方法验证

• 分析方法包括：分析方法和取样方法

• 分析方法验证

  • 专属性
    • 指其他物质存在干扰的情况下，被分析物能准确可靠检测的能力。对于清洁验证来说，干扰物包括降解物、辅料、取样溶剂、取样棉签、清洁剂等干扰

• 准确度

  • 准确度也称为真实度，指真实值或认可的参考值与测量值之间的相近程度，一般用回收率表示，综合回收率要求不低于75%，回收率的RSD要求不大于10%，将测定的回收率中最低值作为校正因子f，样品的测定结果除以校正因子表示样品的实际

• 精密度

  • 指在规定条件下对均质样品多次取样进行一系列检测结果的接近程度，精密度可从三个层次考查：重复性、中间精密度、重现性，精密度考察应使用均质的、可信的样品，如果得不到，可人为配制样品溶液进行研究

• 线性

  • 指在给定的范围内，检测结果与样品中被分析物的浓度（量）成比例关系的能力。范围指能达到一定的准确度、精密度和线性，测试方法适用的试样中被测物的高、低限浓度或量

• 范围

  • 指样品中被分析物的较高浓度和较低浓度的一个区间，并已证实在此区间内，该方法具有合适的准确性、精密度和线性。浓度范围应达到残留物限度的50%~150%

• 检测限和定量限

  • 指样品中的被分析物能被检测到的最低量，定量限是指能定量检测样品中被分析物的最低量。检测限和定量限可采用直观评价和信噪比的方法，或者采用响应值的标准差和斜率的方法进行验证

• 耐用性

  • 指试验参数适当的发生细小改变时，测量保持不受影响的能力，可用于说明正常使用时的可靠性
  • 耐用性测试是在改变其分析参数的条件下，分析方法的适用性，以HPLC方法为例典型变化的参数如下
    • 流动相pH值变化
    • 流动相组分变化
    • 柱温和流速变化

• 溶液稳定性

  • 样品在分析前放置于一定的储存条件下，可能会发生降解和变化，在这些情况下，需要考察被分析物的稳定性。使用同一份溶液，测定其预先选定的时间间隔里结果的差异，以此分析样品的稳定性

• 系统适用性

  • 定量检测时应制备2份对照品，对照品一致性检查不大于5%，对照品的RSD不超过10%

• 检验方法中限度检查和定量检查需要验证的参数

  • 参数	限度检查法	定量检查法
    专属性	√	√
    精密性	×	√
    线性/范围	×	√
    准确度	√	√
    检测限和定量限	检测限验证	定量限验证
    样品溶液的稳定性	√	√
    系统适用性	√（一份标准品）	√（两份标准品平行样）

清洁验证取样方法研究

• 取样方法的选择

  • 为了评估清洁效果，有必要对产品接触的设备表面进行取样，并确定存在的残留量。适当的取样方法是一个清洁验证计划的基本要求，常用的取样方法有：
    • 直接表面取样→目视检查
      • 目检法
        • 当一个清洁程序完成后，应通过目检确认设备表面的可见残留物已被去除
          • 目检存在一定的局限性：如一些设备的表面（如管道）无法直接观察。需借助光学设备如镜子或内窥镜，连同辅助照明帮忙目检
          • 目检的设备表面应干燥，这代表目检的最差条件
      • 仪器法

• 擦拭取样→棉签直接表面取样（首选）

  • 使用棉签等取样工具蘸取适当的溶剂对规定面积的设备表面进行擦拭的取样方法
  • 取样棉签

• 冲洗取样→冲洗取样

  • 一种方法：在最终冲淋过程中“抓取”冲洗溶液的最后一部分作为样品
  • 另一种方法：冲洗取样方法是冲洗过程结束后，单独进行冲洗取样。这个单独取样包括向设备中加入一定体积的溶解，搅拌使冲洗液中残留物分布均匀。然后取出冲洗溶液样品进行分析
  • 哪种方法比较好？

• 安慰剂取样？

• 三种方法结合使用最理想！

• 微生物污染取样

  • 可采用擦拭法（无菌棉签）、接触碟法或淋洗法

• 取样回收率研究

  • 取样回收率研究
    • 通常需要证明采用适当的分析方法和取样程序，可充分测量或量化设备表面的残留物
    • 这些研究为残留物测量的取样以及分析方法建立提供了科学依据
    • 它的目的是建立一个可重现的设备表面回收率
    • 回收率研究可以作为分析方法验证的一部分，或者一旦确定分析方法能够检测溶液中残留物，可单独进行研究
    • 取样回收率研究是由实验室研究的，需要在不同被取样设备材质（如不锈钢、玻璃、PTFE、以及EPDM）试样，并在上面涂布待检测残留物

• “目检"回收率

  • 确定一个定量的“目视检测限”
  • 如果目检只是作为擦拭或冲洗取样的补充，则可以不要求确定“目视检测限”
  • 指定观察条件下的目视检测限可以通过在设备材质试样上涂布不同浓度（μg/cm2）的残留物来确定
  • 并需要一组训练有素的观察者来确定表面残留物明显可见时的最低残留水平
  • 目视检测限的意义在于，如果在清洁验证方案中，在同样（或更严格）的观察条件下确定设备表面已目检洁净，则可认为实际残留水平低于目视检测限
  • 目视检测限取决于残留物性质，表面性质（例如，不锈钢对PTFE）以及观察者的视力。文献报道的典型的目视检测限是 1-4μg/cm2
  • 对于目视检测限，不需要确定回收率。该研究的目的是确定残留物明显可见时的一个残留物水平，这样目视洁净的任何表面上残留水平都低于目视检测限

• 擦拭取样回收率

  • 将已知浓度的残留物溶液均匀涂布在材质试样上，自然晾干，采用一定的擦拭方法进行取样，选用合适的溶剂提取棉签上的残留，然后检测提取液中残留物的数量
  • 回收量与材质试样上的加入量之比就是取样百分回收率
  • 由于擦拭属于人工操作，通常每人需要重复三次回收率研究。每个残留物和表面类型的组合至少需要两个人进行 擦拭回收率研究
  • 研究建立的回收率可以通过不同的方式定义，但通常定义为任意一个擦拭取样人员的最低平均回收率。一个可接受的拭子回收率取决于如何进行拭子回收率试验。如果在回收率研究确认取样方法时，没有对残留限度或分析结果进行修正，回收率通常要求70%或更高。如果回收率用于修正残留物限度或分析结果，回收率一般要达到50%或以上
  • 取样流程

    • 污染

      • 制备加样溶液
      • 污染区域标记
      • 加样污染

    • 取样

    • 使用棉签从表面污染区域取样

    • 提取

    • 将残留物质从棉签回收至测试溶液

    • 测定

    • 采用经过验证的分析方法进行残留物质测定

• 冲洗取样回收率

  • 淋洗法回收率研究同擦拭回收率相似，将目标残留物溶液涂布在材质试样上自然晾干。对于擦拭取样的回收率，必须严格执行预定擦拭步骤。与之相反对于淋洗取样，无法在实验室中准确地重复淋洗步骤（除了提取取样的特殊情况）。然而在实验室中模拟淋洗程序是可行的。在可能的情况下，模拟淋洗的条件应该同实际的设备淋洗条件相同，包括淋洗溶剂以及淋洗溶剂温度的选择。其他情况下，应该选择与设备淋洗相同或最差的淋洗条件，例如回收率研究中溶剂量与被取样表面积之比应该同设备淋洗时相同或更低
  • 模拟冲洗过程的一个方法是在干净的收集容器上方悬挂一个已徒步的材质试样，然后将冲洗液从表面冲过，并收集在收集容器中
    • 图片

• 取样流程

  • 污染

    • 制备加样溶液
    • 污染区域标记
    • 加样污染

  • 取样

    • 模拟试剂淋洗条件，使用溶剂从表面污染区域淋洗
    • 当淋洗条件难以模仿时，使用最差条件

  • 提取

    • 将残留物质从溶剂回收至测试溶

  • 测定

    • 采用经过验证的分析方法进行残留物质测

• 生物负载及内毒素取样回收率（结合擦拭和冲洗取样）

  • 对于微生物取样，不适合进行回收率研究以确定表面回收率
    • 微生物检测的计数问题通常以“菌落形成单位”进行计数而不是单个微生物
    • 在一个标准的取样回收率研究中，当材质试样晾干时微生物会死亡或失去生存能力
    • 不清楚选用哪种微生物进行回收率研究
    • 通常生物负载限度已明显低于可能影响产品质量或工艺性能（如在线灭菌）的水平，因此即使回收率低（<50%），不引入回收因子也不会影响产品质量和/或工艺性能

清洁验证分析方法研究

目标残留物的选定

• 如何选择目标残留物

  • 识别哪一种物料对下一个过程带来最大的风险
    • 高浓度/高毒性/可引起变态反应
    • 影响正确执行下一过程的能力
    • 产生顾客不能接受的情况
    • 最难清除/清洁

• 如何选择最差条件

  • 检查当与其他选择的残留物相对比时，是否有合理的理由找一个残留物作为代表或作为最差条件

    • 最难清洁产品

      • 活性物质的溶解度
      • 剂型
      • 活性物质在产品中的浓度
      • 辅料的物理及化学性质
      • 一些特殊的工艺过程

    • 最难清洗设备

      • 设备的构造/材料/尺

清洁验证分析方法的验证

• 清洁分析方法要求
  • 检验方法对于分析物是特定的，最好专门针对分析物
  • 必须通过方法验证证明分析方法的适用性

清洁验证风险评估（多产品共线？）

最初的评估阶段

• 尽早准备清洁验证主计划并批准

  • 定义：高级文件，计划清洁验证的编写、执行到最后验证报告的编写的整个过程

  • 内容（类似于方案了？）

    • 目的、范围

    • 描述和北京

    • 责任

    • 参考资料

    • 术语和定义

    • 验证的方法

      • 清洁验证的先决条件
      • 喷淋装置覆盖试验（如果需要）
      • 设备的清洗类型
      • 清洗剂的选择及依据
      • 清洗程序的循环开发要求
      • 污染物的评估
      • 清洗工艺的最差条件及定义
      • 设备、产品分组/分类
      • 上下游产品的具体清洗要求
      • 质量风险管理的应用要求
      • 设备保存时间的要求
        • CEHT干净设备保存时间
        • DEHT脏设备保留时间
      • 生物负载（如微生物、内毒素）
      • 取样技术的培训和确认
      • 取样技术
      • 清洗方法
      • 分析方法
      • 特定分析方法和非特定分析方法使用的原理
      • 回收率的要求

    • 可接受限度计算的依据

    • 清洁验证总结报告

    • 日常监测和维护

    • 变更控制和再验证要求

    • 计划和时间表

    • 附件

• 清洁验证影响因素

  • 鱼骨图

    

  • 材料

    • 清洗剂（关键）

      • 成分单一、制药行业允许的清洁剂
      • 测定清洁剂的残留
      • 大宗芳香型（不允许）
      • 根据设备使用的清洗剂类型进行分组

    • 清洗工具（关键）

      • 没有脱落物质
      • 重要清洗剂变更导致清洁验证重新开始

    • 水的质量

    • 残留物

  • 方法

    • 分析方法（关键）
      • 清洁验证前，要完成清洁验证相关的分析方法验证
      • 分析防范最好专门针对被检测物
      • 只要最差条件的残留限度中包含所有的被分析物，可以采用非特定的分析方法，比如TOC
      • 一般使用实验室已经有的分析方法
      • 必须通过方法验证证明分析方法的适用性
    • 取样方法
    • 清洗SOP的T.A.C.

  • 测量

    • 分析&取样（关键）
      • 样品分析所用的所有仪器必须进行鉴定，并在有效期内
      • 样品检测及分析要严格按照相关SOP进行
    • 设备的校准
    • 回收率试验

  • 环境

    • 房间温湿度（非关键）
      • GMP要求
        • 必要的温湿度要求
          • 必要的温湿度要求
          • 公司可根据不同的工艺确定
        • 房间清洗：目视合格

• 验证状态的维护

  • 预防性维护

    • 定义

      • 确保设备正确运行的计划活动
      • 确保正在使用的操作设备无故障
      • 确保持续符合验证时的参数
      • GMP对此有要求
      • 预防性维护不是维修或改造

    • 预防性维护和清洁

      • 清洁剂喷洒设备功能正常，没有堵塞

      • 确保喷淋求/喷淋设施没有堵塞并且可以自由旋转（如果适用）

      • 确保阀门可以正常开启并且进行了良好的保养

        • 磨损、腐蚀、剥落、泄露

      • 对于手动系统，应确保

        • 对清洁工具进行周期性检擦，如果需要，要进行更新

• 校准

  • 定义

    • 根据被认同的标准，对设备的满量程或使用量程进行测试（如果需要，也可以进行调整），以确保他们的准确性
    • 为产品、设备和员工的安全所需要
    • GMP中有要求

  • 校准要考虑的因素

    • 要求证明该校准标准由可追溯性
    • 在任何操作之前，确认所有工艺设备和仪器的校准状态
    • 任何会影响到校准的事故要报告，以确保校准结果是有效的或具有重现性
    • 确保规程清洗明确，包括要明确写出何时需要调整-定义允许范围一定要认证
    • IQ/OQ应该能证实仪器范围和准确度对于要求的工艺控制能力是合适的

  • 校准和清洁

    • 对于所有要保证T.A.C.T的设备，都需要校准
    • 考虑传感及（例如，电动喷淋球上的传感器）是否是校准的一部分或者PM程序的一部分
    • 确保工艺检测/控制和清洁检测/控制的公用仪表的量程和精确度都适用于这两个功能

• 变更控制

  • 定义
    • 目的是通过审核和批准变更以维护验证状态（比如，工艺控制）
    • 文件变更主要用于
      • 工艺改进（计划的变更）
      • 维护/替换（计划的或非计划的）

• 监测

• 再验证

  • 再次进行全面或部分验证的研究，根据来自于进行中的工艺或在线控制的数据以证明实际与验证结果的一致性

• 必须确定清洁验证的范围与目的并书面进行记录

• 考虑所需要进行清洁验证的水平

• 开始最初的数据收集

设备的评估

• 将设备/部件按下述情况进行分类

  • 接触产品-应该在清洁验证中进行确认
  • 偶尔接触产品-应该再清洁验证该类设备/部件为“目测洁净，干燥并且无嗅”
  • 不接触产品-一般无需再清洁验证中进行确认，但必须考虑清洁剂残留及微生物污染等因素
  • 关于是否某个产品/部件是否包含再清洁验证中应该再理论依据的章节进行书面的记录

• 将接触产品及偶尔接触产品的设备/部件按下属方式分类

  • 一次性使用，一次性使用的部件（如小桶的衬垫，某些过滤器）
  • 某个产品专用部件（如压片机的冲子，震荡筛的筛网）
  • 多个产品共用的部件
  • 每个部件的分类必须注明原因并进行详细的记录

• 当清洁只用于同一种产品的不同批次生产中（或在原料生产中同一中间体的不同批）时，公司只需满足设备“看得见的清洁”即可

• 这种批次间的清洁工艺无需验证

  • FDA 清洁工艺验证 1993.07
  • Determine the number of cleaning processes for each piece of equipment………Such between batch cleaning processes do not require validation

• 设备清洁属性设计确认…..

  • 设备设计（很重要！）→设备性能
  • 设备清洁属性确认与验证

• 用户需求

  • 合规需求

    • GMP中关于设备清洁的要求

  • 工艺需求

    • 清洁工艺需求（目标产品的清洁需求

  • 管理需求

    • 控制管理需求

• 具体化用户需求

  • 总体要求

    • 设备有在线清洁功能，应确保冻干箱和冷阱所有地方都能清洗到，应确保无死角，清洗能覆盖箱体内表面
      • 板层可实现动态清洗，在机房与无菌室内均设有控制升降按钮
      • 视镜内部须有清洗头，以保证清洗冻干机时能有效对其进行清洗

  • 材质及加工要求

    • 冻干箱前箱箱体

      • 采用进口AISI316L不锈钢制造
      • 箱体内部所有转角均应圆弧过渡，且圆弧角R≥50mm，Ra≤0.4μm，箱底有一定倾斜度，排水口与排除阀的距离应尽可能短，排水口有一个金属过滤网

    • 板层

      • 采用AISI316L不锈钢制造
      • 板层应坚固平整，板层平整度应小于±0.3mm/m2，表面Ra≤0.4μm

    • 冷阱

      • 冷阱材质为进口AISI316L不锈钢，内部部件不允许用有色金属制造，内表面Ra≤0.4μm，管路焊接无毛

    • 清洗管道及阀门

      • 设备自带管路需满足3D要求，同时避免清洗后积水与盲管，各工位清洗效果均可验证
      • 管道材质应为AISI316L不锈钢，全部采用自动焊接，内窥镜检查
      • 连接应用快接头，并用卫生级密封垫密封，不得有螺纹连接方式
      • 进水阀门要求采用卫生级阀门，材质应为316L，要能耐受蒸汽灭菌的高温，重要阀门需要信号反馈
      • 清洗水的控制应采用卫生级隔膜阀。隔膜阀的膜片应为PTFE材质
      • 在线清洗需要清洗水取样

    • 附属设施

      • 设置外置清洗站，配置单罐双泵系统，储罐能满足CIP要

    • 清洗程序

      • 可调用固定的清洗程序，自动清洗冻干箱、冷阱及相关部件，清洗程序通过三级密码权限保护
      • 操作方便：手动和自动，可切换
      • 清洗管道及结构设计必须考虑对冻干箱盒冷阱分步清洗
      • 冻干小门在执行清洗与灭菌等程序前必须具有自锁功

• 在线清洗的设计

  • 设计的基本框架

• 相关支持文件

  • 功能规范（Function Specification，FS）
  • 设计规范（Design Specification，DS）
  • 硬件设计规范（Hardware Design Specification，HDS)
  • 软件设计规范（Software Dedign Specification，SDS）
  • 图纸
    • 布局图
    • P&ID

• 设计需求

  • URS：在线清洁，对清洗喷头必须做喷淋覆盖测试，清洗面积全覆盖
  • 首先明确需要清洗覆盖的部位
    • 箱体内表面
    • 板层外表面
    • 观察窗视镜
    • 冻干箱门
    • ……

• 清洁验证的设计

  • 技术要求

    • 所有管材均使用316L卫生管

    • 采用自动焊接，接口抛光处理Ra≤0.4μm

    • 提供证明材料（包括焊接文件、内窥文件）

    • 所有焊点必须编号且标注在焊接图上

    • 手动焊接100%内窥镜监测，自动焊接30%以上内窥镜检测

    • 喷嘴安装类型

      • 进料侧喷淋架立管安装锥形喷嘴n个
      • 出料侧喷淋架立管安装锥形喷嘴n个
      • 进料侧小门喷淋管安装扇形喷嘴n个，锥形喷嘴n个
      • 出料侧小门喷淋管安装扇形喷嘴n个，锥形喷嘴n个
      • 左喷淋主管安装锥形喷嘴n个
      • 右喷淋主管安装锥形喷嘴n个
      • 视镜喷淋管安装锥形喷嘴n个
      • 旋喷安装锥形喷嘴n个

    • 清洗覆盖率测试

      • 顶喷覆盖效果
      • 
      • 板层清洗覆盖效果
      • 

• 设计确认

  • 用户需求和设计确认
  • CIP程序设计
  • 设计确认文件示例

产品的评估

• 对所有相关的产品获得如下信息

  • 活性成分
  • 批量
  • 标准日计量
  • 毒性
  • 溶解性
  • 生产量
  • 暴露剂量

• 产品的辅料是否对清洁规程产生不利的影响

  • 阻止设备表面变湿
  • 粘在设备表面
  • 颜色，香味或其他气味
  • 不溶解
  • 难清洁度，一般不涉及，除非辅料有某种不寻常的毒性

• 多产品共线风险评估

  • 为什么进行多产品共线风险评估

    • 共线生产
      • 在药品生产中，有多个产品使用共用的厂房、设施、设备等情况
    • 法规要求：中国GMP第四十六条

  • 多产品共线风险评估执行概述

    • 多产品共线风险评估的执行阶

    • 多产品共线存在的危害

      • 交叉污染
      • 混淆
      • 人为差错

    • 多产品共线风险评估的要求

      • 经可行性评估确定可以共线生产的，应列出共线生产涉及的厂房、设施、设备和品种的清单，并明确所采取防止交叉污染的措施，如采用阶段性生产法方式、设备的清洁及其验证、生产计划的合理安排、部分风险高的工序采用专用设备和容器据等等

• 需要进行哪些准备工作

  • 评估团队准备

    • 评估团队：Subject Matter Experts（SMEs）
      • QRM负责/风险评估小组主导人
      • 研发专家
      • 产品专家
      • 技术转移人员
      • 生产操作人员
      • 工程人员
      • 项目人员
      • 验证人员
      • QA
      • QC
      • 供应商（如适用）
    • 在某一特定领域或方面（如质量部门，工程学，自动化技术，研发，销售等），个人拥有的资格和特殊技能
    • 团队成员应具备与系统、相关控制及客户（内部的和外部的）期望有关的知识

  • 资料准备

    • 项目计划（VMP）
    • 产品清单和化学品安全说明书（MSDS)
    • 工艺说明（PFD）
    • 厂房布局图（人物流向图）
    • 工艺设备布局图（P&ID）
    • 其他支持资

  • 选择风险管理工具

    • 初始：决策树→过程中：流程图→后期：FME

  • 文件准备

    • SOP

      • FMEA SOP
      • 简单风险管理工具SOP
      • 多产品共线风险评估SOP

    • 规程

      • 质量风险管理程序
      • 工艺规程

    • 模板

      • 多产品共线风险评估报告模

• 多产品共线风险评估执行流程

  • 共线产品可行性评估

    • 流程

    • 评估了交叉污染的风险

      • 空气传播
      • 人流、物流的转运
      • 产品的混淆
      • 产品和工艺的特性

    • 进行清洁验证是不是就可以了？

      • 持续监控风险处于受控状态

    • 粉尘扩散控制评估了交叉污染的风险

      • 空气传播
      • 人员意识和习惯

    • 清场、清洁的持续性

    • 管理的重要性

• 多产品共线风险评估的因素

  • 对可以共线生产的药品，应根据产品的具体特性、工艺和预定用途等因素做具体分析。可行性评估可考虑一下因素

    • 拟共线生产品种的特性

      • 产品特性分析

        • 产品类别
        • 毒性
        • 活性
        • 致敏性
        • 溶解度
        • 是否为活性微生物
        • 形状
        • 其他

      • 产品特性结论

        • 可多产品共线：拟共线生产品种特性相似或相近
        • 不可多产品共线：拟共线生产品种特性具有特殊性

    • 共线生产品种的工艺

      • 工艺分析

        • 拟共线生产产品的工艺流程图
        • 拟共线生产产品的工艺说明
          • 备料和称量→配制→除菌过滤→灌装→冻干→轧盖
          • 支持性程序
          • 直接接触产品容器的准备、灭菌和除热原
          • 胶塞的准备
          • 已灭菌设备和部件的储存和转运
          • 工艺储罐和直接接触产品设备的清洁和灭菌
        • 最终灭菌或非最终灭菌
        • 采用生物过程进行生产
        • 生产过程中所使用物料的特性

      • 工艺分析结论

        • 可多产品共线：拟共线生产产品的工艺步骤相似
        • 不可多产品共线：拟共线生产产品的工艺有特殊性

    • 共线生产品种的预定用途

      • 给药途径

        • 外用
        • 口服
        • 肌肉注射
        • 静脉注射
        • 鞘膜内注射

      • 临床适应症

        • 适应症：指适合某种治疗方法、手段的疾病和临床症状
        • 如：注射用头孢拉定：适用于敏感菌所导致的急性咽炎、扁桃体炎、中耳炎、支气管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮肤软组织感染等

      • 用药禁忌、配伍禁忌或联合用药

      • 用药对象

      • 用药计量

      • 慢性病用药或长期用药

      • 其他

    • 拟共线生产分析结论

      • 可共线生产
      • 不可共线生产

  • 设施、系统和设备的共用风险评估

    • 风险评估矩阵

    • 评估结论

      • 设施、系统和设备可共用：共线产品生产的设施、系统和设备不用专用，但需要采取相关的控制措施
      • 设施、系统和设备不可共用：共线产品生产的设施、系统和设备需要专用，同时需要采取其他的控制措施

清洁验证执行

清洁验证的维护

Q&A