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移液器的重要性
- 移液是实验室中最常见不过的操作,数据的生成很大程度上收到移液器性能以及使用者操作技术的影响
- 当移液数据出现问题时,我们总会怀疑移液器的性能,但是科学文献表明,移液技术对试验的成败也起到关键作用。
- 忽略技术指导可能会造成时间上和金钱上的巨大损失
- 简单的移液培训操作即可提高移液的准确性
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常见的移液器移液的5个步骤和注意事项
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最佳量程选择与量程设定
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移液范围选择在满量程的35%~100%时,可以保证最佳的准确性和重复性。选择合适的量程可以提高1%移液精度!尽量避免将移液器量程设置为最大值的10%一下
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设定齿轮控制的移液器量程时,始终保持【下调】到所需量程,当由小量程调节到大梁城时,旋转调节旋钮到达超过所需量程1/3圈处,然后回调到所需量程准确位置,这样能够减少机械回冲或者齿轮欢动带来的影响
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浸入深度
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将吸头进入合适的深度可以提高5%的准确性。吸头浸入太深会导致吸液偏多,相反,浸入太浅会吸入空气
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各种型号规格的移液器推荐的吸头浸入深度:
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规格 浸入深度 2~10μL 1~2mm 20~200μL 2~3mm 200~2000μL 3~6mm 2000μL以上 6~10mm -
角度
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手持移液器的角度也会影响准确性。保证吸液或排液时偏离垂直不超过20°,可以提高2.5%的准确性
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润洗
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润湿是一种快速、简单的提升移液准确性高达0.2%的方法
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液体在吸头内壁上残留形成液体薄膜,这样所得的错误值小于理论值
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想要获得更好的移液精度,可以在安装新吸头后,用相同样品对吸头进行2~3此润洗,这样薄膜会保持相当的恒定,从而提高移液的准确性和重复性
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吸液
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保证吸液的一致性可以提高5%的准确性
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移取不同样品时,使用一致的移液节奏,按压或释放按钮的速度平稳一致,到达第一停止点的用力应保持一致
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快速或不平稳的吸液会使液体喷溅、产生气雾、套柄污染以及样品量损失
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分液
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良好的分液技巧也能提高1%的准确性
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分液时用吸头接触容器壁时可以获得更好的一致性
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将吸头的孔口端沿着容器壁向上滑动可以去除孔口端残留的液体
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另外两种技巧同样非常适用于水溶(非粘性)液