- 柱效(反应柱子装填效果,柱效不行的时候就该考虑重新装柱了!!!) - 柱效组成和评判标准 - 理论塔板数(N) - 跟装柱高度有关,柱高越高,理论塔板数越高 - N=5.54(Ve/Wh)2 ◊ Ve:洗脱体积,峰尖对应的体积 ◊ Wh:半峰高的宽度 - 每米理论踏板数(Nh) - Nh=N/L ◊ N:理论塔板数 ◊ L:柱床高度,cm - 理论塔板高度(HETP) - 跟填料颗粒大小有关,大颗粒的理论塔板高度大,一般在3\~5倍颗粒直径比较好 - HETP=L/N - 不对称因子(As) - 1/10峰高左右两边宽度的比值,0.8\~1.2最好 - As=1:峰最好的形状 - As>1:峰拖尾, - As<1:峰前倾, - 图片 >  >  - 测柱效方法 - 走样品 □ 流速:15\~30cm/h - 1%丙酮(紫外280nm检测)或2M NaCl(电导检测) □ 上样体积:0.5%\~2% - 柱效测定常见的问题、原因和措施 | 问题 | 原因 | 措施 | |------------------------------------------------------|---------------------------------------------|-------------------------------------------------------| | 峰前倾 | 柱床过紧 | 重装柱子或降低装柱流速 | | 峰拖尾 | 柱床过松 | 重装柱子或增加装柱流速 | | 双峰,主峰前有“额外峰”,柱床上裂缝 | 泵脉动,产生空气 柱床过紧 | 使用其他类型的泵或增加空气陷阱 重装柱子或降低装柱流速 | | 双峰,主峰后有“额外峰”,柱床上或介质与入口之间有裂缝 | 柱床过松 | 重装柱子或调整柱头,增加装柱流速 | | 不对成因素增加(拖尾增加,前伸减少) | 柱床过松,介质与入口有空气 柱子没有适当平衡 | 重装柱子或增加装柱流速 重新平衡柱子,重新测试 | | 不对成因素增加(前伸增加,拖尾减少) | 柱床过紧,有裂缝且越加严重柱子没有适当平衡 | 重装柱子或降低装柱流速重新平衡柱子,重新测试 | | 板数量减少 | 柱床过紧或过松 | 重新装柱 |