# 构建细胞/工程菌时需要考虑纯化

# 表达位置

分胞内、胞外

hGH为分泌间质表达

表达位置决定了破碎的方法

# 冻融目的

使细胞松散

# 超滤

先超滤后盐析，因为体积大

经验值：目的分子（大分子）÷膜孔（5KD，hGh）=1.5倍

# 盐析

破坏蛋白亲水性水化膜，暴露疏水核

影响因素

蛋白浓度，体系中盐的浓度

过饱和盐：全部蛋白

不饱和盐：有目的筛选