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- 柱效(反应柱子装填效果,柱效不行的时候就该考虑重新装柱了!!!)
- 柱效组成和评判标准
- 理论塔板数( N)
- 跟装柱高度有关,柱高越高,理论塔板数越高
- N=5.54( Ve/Wh) 2
◊ Ve: 洗脱体积, 峰尖对应的体积
◊ Wh: 半峰高的宽度
- 每米理论踏板数( Nh)
- Nh=N/L
◊ N: 理论塔板数
◊ L: 柱床高度, cm
- 理论塔板高度( HETP)
- 跟填料颗粒大小有关, 大颗粒的理论塔板高度大, 一般在3\~5倍颗粒直径比较好
- HETP=L/N
- 不对称因子( As)
- 1/10峰高左右两边宽度的比值, 0.8\~1.2最好
- As=1: 峰最好的形状
- As> 1: 峰拖尾,
- As< 1: 峰前倾,
- 图片
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- 测柱效方法
- 走样品
□ 流速: 15\~30cm/h
- 1%丙酮( 紫外280nm检测) 或2M NaCl( 电导检测)
□ 上样体积: 0.5%\~2%
- 柱效测定常见的问题、原因和措施
| 问题 | 原因 | 措施 |
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| 峰前倾 | 柱床过紧 | 重装柱子或降低装柱流速 |
| 峰拖尾 | 柱床过松 | 重装柱子或增加装柱流速 |
| 双峰,主峰前有“额外峰”,柱床上裂缝 | 泵脉动,产生空气 柱床过紧 | 使用其他类型的泵或增加空气陷阱 重装柱子或降低装柱流速 |
| 双峰,主峰后有“额外峰”,柱床上或介质与入口之间有裂缝 | 柱床过松 | 重装柱子或调整柱头,增加装柱流速 |
| 不对成因素增加(拖尾增加,前伸减少) | 柱床过松,介质与入口有空气 柱子没有适当平衡 | 重装柱子或增加装柱流速 重新平衡柱子,重新测试 |
| 不对成因素增加(前伸增加,拖尾减少) | 柱床过紧,有裂缝且越加严重柱子没有适当平衡 | 重装柱子或降低装柱流速重新平衡柱子,重新测试 |
| 板数量减少 | 柱床过紧或过松 | 重新装柱 |