test/海济工艺/纯化工艺.md

介质原理→关键性能→评估→哪些评价的控制策略→收集数据评价→结果→结论

构建特性→下游纯化工艺

裂解为有菌区，后续粗纯为无活菌区（工程菌）

验证策略控制与工艺设计相关

属性：分子筛？官能团？

产品工艺和工艺功能

功能原理结合蛋白性质来写

大分子分子筛效应不明显，扩散弱

柱效：均一性、松紧：对称性，N代表分离能力

分子筛

全排阻，N不重要，对成型重要，类似与化工类的蒸馏塔

脱盐、除色素

非全排阻（进孔）

路径不一样

反压大→碎胶多→装柱效果差→筛胶

日常维护（装填、封存）

清洁（前后处理、CIP）

来源类型

天然

表达

踏板

引用化工蒸馏的概念

装柱工艺

柱效测定

小分子扩散探测评价介质分布情况

图谱（吸附类的）：产品来评价吸附，官能团多少直接影响吸附能力和分离能力

柱效

定期测柱效的标准

合格限

行动限

警戒限

中间柱效变化由图谱体现，如果中间某次图谱异常，怎么办？监测下样液合格即可放行？

上样液可以过滤，减少柱子的压力，延长层析柱的使用寿命

柱头膜堵塞

反向冲洗、超声波冲洗，目视看不出来

柱壳问题，正向上样不行，可以尝试反向上样

缓冲液中，EDTA（金属螯合剂，抢夺酶的金属离子）抑制酶的作用

工艺参数

柱桶规格

柱高

柱内直径

径高比

上样载量（体积）：上样体积大，滞留时间长

上样浓度：浓度高，热扩散明显，蛋白的溶解上限

样品状态：粘度、颗粒物

基线：规定基线范围

柱效要求

线性流速：流速高，介质耐受问题；流速低，滞留时间长，分离度差

缓冲体系

柱温（以流出液温度为准）和环境温度

洗脱

分离度：连续梯度洗脱优于恒定洗脱

恒定洗脱

连续梯度洗脱

手工较难实现，一般通过设备实现

图谱

根据图谱可以反推柱子和样品的状态